Uma medida de limpeza

Cientista do UNM Cancer Center desenvolve e valida um método para testar superfícies para partículas de vírus.

Consultórios médicos e hospitais limpam meticulosamente os equipamentos médicos não descartáveis ​​que usam repetidamente. Equipamentos que não podem ser esterilizados por calor devem ser limpos com desinfetantes poderosos. Michelle Ozbun, PhD, especialista internacional em vírus, queria saber a eficácia desses desinfetantes.

Ozbun e sua equipe desenvolveram uma maneira de medir quantas partículas infecciosas do papilomavírus humano são deixadas em uma superfície depois que ela foi desinfetada. Eles descobriram que desinfetantes aprovados para uso em dispositivos médicos funcionam bem, e recentemente publicou seu trabalho online na revista The Lancet EBioMedicine.

Ozbun é professor de Obstetrícia e Ginecologia e de Genética Molecular e Microbiologia na Universidade do Novo México. Sua pesquisa se concentra no HPV, que causa mais de 90% dos cânceres cervicais e anais e mais de 70% dos cânceres vaginais e de garganta, de acordo com os Centros de Controle e Prevenção de Doenças.

Ela explica que as partículas de HPV, como todos os vírus, precisam invadir uma célula para produzir cópias de si mesmas. E para invadir uma célula, o capsídeo da partícula do vírus deve estar intacto.

O capsídeo é a camada externa de uma partícula de vírus. É feito de proteínas virais e contém o material genético do vírus, que codifica essas proteínas. Alguns vírus, chamados de vírus envelopados, têm uma camada de moléculas semelhantes a gordura cobrindo as proteínas virais.

“Coronavírus, HIV e herpesvírus são todos vírus com envelope”, diz Ozbun. “Eles são muito mais suscetíveis a secar em uma superfície. E se secarem, não são infecciosos. ”

Vírus como HPV, poliovírus e norovírus têm capsídeos feitos apenas de proteínas, o que significa que podem permanecer em superfícies por muito tempo sem se tornarem inativados, diz Ozbun. “E então”, diz ela, “eles também são muito mais difíceis de inativar por desinfetantes”.

Como o HPV não mata as células, a única maneira de detectar sua presença - até agora - tem sido pegar uma amostra das células, triturá-las e procurar no material genético os genes do vírus.

“Quando as pessoas em campo procuram ver se as pessoas têm HPV”, diz Ozbun, “elas estão apenas detectando os genomas virais que estão lá. Eles não sabem [se] esses genomas virais são empacotados dentro do capsídeo. ” E uma vez que as células foram moídas, a contagem do número de partículas de HPV intactas torna-se impossível.

Um problema adicional com o método de moagem, explica Ozbun, é que o interior das células se mistura. Não há como saber se muitas células da amostra estão infectadas com um baixo nível de produtos de vírus ou se apenas algumas células estão infectadas com muitos produtos de vírus.

Ozbun precisava de métodos mais sensíveis, então ela os criou.

Primeiro, Ozbun e sua equipe obtiveram amostras virais de três fontes. Eles cultivaram partículas de HPV no laboratório de Ozbun, obtiveram amostras de HPV de outro laboratório e coletaram amostras de HPV de pacientes no Novo México. Em seguida, eles infectaram células em um laboratório com as amostras virais. Mas então eles fizeram algo diferente: em vez de triturar as células, eles adicionaram uma coloração que se liga ao RNA viral e tiraram imagens das células.

As imagens de Ozbun mostram células intactas com RNA viral em seu interior. Usando sofisticadas técnicas microscópicas desenvolvidas no UNM Comprehensive Cancer Center, ela e sua equipe são capazes de contar quantas células estão infectadas, permitindo-lhes calcular quantas partículas de vírus estavam presentes.

Usando suas imagens e métodos de contagem, Ozbun e sua equipe conseguiram mostrar que os desinfetantes comumente usados ​​reduzem o número de partículas virais em pelo menos 10,000 vezes. Eles mostraram que os desinfetantes tiveram resultados semelhantes, independentemente da fonte viral. E eles mostraram que seus métodos eram sensíveis à gama de partículas que a maioria dos hospitais e consultórios médicos normalmente encontram.

Seu novo método, diz Ozbun, “é uma maneira importante de diferenciar a quantidade de ácido nucléico presente em relação ao que é realmente infeccioso. Esta é a única maneira de sabermos o número de partículas infecciosas. ”

Ozbun explica ainda que muitos procedimentos de limpeza exigem que o equipamento seja lavado antes de ser desinfetado. A lavagem elimina muitas partículas infecciosas antes de usar o desinfetante.

O resultado, diz ela, é que hospitais e consultórios médicos “têm um nível de confiança ainda maior de que [eles] não vão expor os pacientes a vírus que sobraram de outra pessoa”.

Sobre Michelle Ozbun, PhD

Michelle Ozbun é professora dos departamentos de Obstetrícia e Ginecologia e Genética Molecular e Microbiologia. Ela é professora dotada de Oncologia Viral com a Maralyn S. Budke e co-lidera o Programa de Pesquisa em Oncologia Celular e Molecular do UNM Comprehensive Cancer Center.

Referência de papel       

"Títulos infecciosos de papilomavírus humano (HPVs) em lesões de pacientes, considerações metodológicas na avaliação da infecciosidade do HPV e implicações para a eficácia de desinfetantes de alto nível”Foi publicado online em janeiro de 2021, em EBioMedicine por The Lancet. Os autores são: Michelle A. Ozbun, PhD; Virginie Bondu, MA; Nicole A. Patterson, BS; Rosa T. Sterk, BS; Alan G. Waxman, MD; Erica C. Bennett, MD; Rohini McKee, MD; Ankur Sharma, MD; Jeremy Yarwood, PhD; Marc Rogers, PhD; e Gary Eichenbaum, PhD.