Áreas de especialidade

A pesquisa no laboratório Osley está focada no papel da cromatina na expressão gênica, replicação de DNA e reparo de quebra de fita dupla de DNA. Usamos o organismo modelo, Saccharomyces cerevisiae, para investigar esses processos celulares em células quiescentes, que representam células não crescentes, mas viáveis, que estão na fase G0 do ciclo celular.osley-1.jpeg

O epigenoma das células quiescentes: Usando abordagens genômicas, nossos estudos recentes enfocaram o papel da cromatina no desenvolvimento de células quiescentes que são formadas em fase estacionária após o esgotamento da glicose. Esses estudos mostraram a retenção de várias marcas de metilação de histonas e RNA polimerase II em genes inativos em células quiescentes, sugerindo que o epigenoma das células quiescentes leva essas células a retomar o crescimento quando os nutrientes são restaurados.

As células de levedura quiescentes também são um excelente modelo para o estudo da vida útil cronológica. Estamos realizando uma triagem genética para mutantes de modificação de histonas para identificar modificações pós-tradução de histonas que são necessárias para o desenvolvimento de células quiescentes e sua sobrevivência a longo prazo.

Programa de replicação de DNA de células quiescentes: As células quiescentes entram novamente no ciclo celular e retomam a divisão quando a glicose é restaurada. Usando abordagens moleculares, genéticas e genômicas, estamos definindo o programa que inicia a replicação do DNA em células G0 quiescentes sob essas condições e comparando-o com o programa que ocorre quando as células G1 entram na fase S. Nossos dados encontraram diferenças significativas nos programas de iniciação de DNA entre células G1 e G0.

Reparo de DNA em células quiescentes: As células quiescentes são resistentes a muitos agentes que danificam o DNA, mas são mais sensíveis à radiação ultravioleta do que as células em crescimento e acumulam mais mutações em seu genoma. Estamos realizando análises moleculares, genéticas e genômicas para definir as vias e mecanismos que contribuem para o aumento da mutagênese induzida por UV nessas células.

Publicações Chave

Young, CP, Hillyer, C, Hokamp, ​​K, Fitzpatrick, DJ, Konstantinov, NK, Welty, JS, Ness, SA, Werner-Washburne, M, Fleming, AP e Osley, MA: Perfis distintos de metilação e transcrição de histonas são estabelecidos durante o desenvolvimento da quiescência celular em leveduras. BMC Genomics. 26 de janeiro; 18 (1) de 2017.

Wiest, NE, Houghtaling, S, Sanchez, JC, Tomkinson, AE e Osley, MA. O remodelador de nucleossomos dependentes de ATP SWI / SNF promove o início da ressecção na quebra da fita dupla de DNA em levedura. Nucleic Acids Research 45: 5887-5900, 2017.

Trujillo, KT e Osley, MA: A role for H2B ubiquitylation in DNA replication, Mol Cell, 48: 734-746, 2012.

Shieh, GS, Pan, CH, Wu JH, Sun, YJ, Chang, KW, Tung, L, Chang, TH, Fleming, A, Hillyer, C, Berger, SL, Osley, MA * e Kao, CK *: a ubiquitilação H2B é parte da arquitetura da cromatina que marca a estrutura exon-íntron na levedura em flor. BMC Genomics. 22 de dezembro; 12 (1): 627 [epub ahead of print], 2011.

Houghtaling, S, Tsukuda, T e Osley, MA: Ensaios moleculares para investigar mudanças na cromatina durante o reparo de quebra de fita dupla de DNA em leveduras. Métodos em Biologia Molecular, 745: 79-97, 2011.

Nakanishi, S, Lee, JS, Gardner, JM, Takahashi, Y, Chandrasekharan, Sun, ZW, Osley, MA, Strahl, B, Jasperson, SL, Shilatifard, A: A monoubiquitinação de histona H2BK123 é o determinante crítico para a trimetilação de H3K4 e H3K79 por COMPASS e Dot1. J Cell Biol, 186: 371-377, 2009.

Tsukuda, T, Lo, YC, Krishna, S, Sterk, R, Osley, MAe Nickoloff, J: a remodelação da cromatina dependente de INO80 regula os estágios iniciais e finais da recombinação homóloga mitótica. Reparo de DNA, 8: 360-360, 2009.

Fleming, AB, Kao, CF, Hillyer, C, Pikaart, M e Osley, MA: A ubiquitilação de H2B desempenha um papel na dinâmica do nucleossomo durante o alongamento da transcrição. Cell Mol, 31: 57-66, 2008.

Xiao, X, Kao, CK, Krogan, N, Greenblatt, J, Sun, ZW, Osley, MA, e Strahl, B: a ubiquitilação dependente de Rad6 de H2B está associada ao alongamento da RNA polimerase II.  Mol. Célula. Biol. 25: 637-651, 2005.

Tsukuda, T, Fleming, A, Nickoloff, JA e Osley, MA: Remodelação da cromatina em um local de quebra de fita dupla de DNA em Saccharomyces cerevisiae. Natureza 438: 379-383, 2005.